荧光显微镜通常需要在黑暗的环境下操作,才能对标本的图案进行鉴别,该设备操作简单,检测快速,能够很好的用于活体检测,和微生物新城代谢的变化过程,使用荧光显微镜之前要详细阅读说明书,进入实验室后打开设备等待一定时间后再开始工作,这样才能减少眼睛的伤害,下面是详细介绍。
一、荧光显微镜的特点
1、它以紫外光或兰紫单色光激发标本的荧光。因紫外光是不可见光,故由标本发出的荧光与背景反差很大。荧光显微镜通常是在黑暗的背景下观察彩色图象的,而普通显微镜是在亮的背景下观察较暗的样品的。荧光显微镜的对比度约为普通显微镜的一百倍,因此可观察到用普通显微镜看不到的结构和细节。
2、用肉眼或普通显微镜观察经荧光色素染色的样品时,只可看到整个标本仅以同一颜色着色。而用荧光显微镜观察时,标本会发出染色色素特有的荧光,呈现出标本的彩色图案,易于鉴别,可减轻眼睛的疲劳。
3、用荧光色素染色,方法简单,制作标本容易,有利于快速工作。
4、用于染色的荧光色素只要很低的浓度就能发出明亮的荧光,一般对机体无毒,故有利于活体观察,如研究功能器官的变化过程和细微结构,某些代谢过程的变化等。
5、利用荧光还有助于分析物质的化学成分。例如,组织中有些重要成分能与药物起作用而发荧光,拒此可鉴定它们的存在或定位。
二、荧光显微镜使用注意事项
1、严格按照荧光显微镜说明书要求进行操作,不要随意改变程序。
2、荧光显微镜应在暗室中进行检查。进入暗室后,接上电源,点燃超高压汞灯5~15min,待光源发出强光稳定后,眼睛完全适应暗室,再开始观察标本。
3、防止紫外线对眼睛的损害,在调整光源时应戴上防护眼镜。
4、检查时间每次以1~2h为宜,超过90min,超高压汞灯发光强度逐渐下降,荧光减弱;标本受紫外线照射3~5min后,荧光也明显减弱;所以,更多不得超过2~3h。
5、荧光显微镜光源寿命有限,标本应集中检查,以节省时间,保护光源。天热时,应加电扇散热降温,新换灯泡应从开始就记录使用时间。灯熄灭后欲再用时,须待灯泡充分冷却后才能点燃。一天中应避免数次点燃光源。
6、标本染色后立即观察,因时间久了荧光会逐渐减弱。若将标本放在聚乙烯塑料袋中保存,可延缓荧光减弱时间,防止封裱剂蒸发。
7、荧光亮度的判断标准:一般分为四级,即“-”表示无或可见微弱荧光。“+”表示仅能见明确可见的荧光。“++”表示可见有明亮的荧光。“+++”表示可见耀眼的荧光。